凍干熒光PCR試劑凍干方法是將熒光PCR試劑經過預凍,在真空狀態(tài)下進行升華,后可制備成凍干粉。凍干熒光PCR試劑時,選用的反應管在做凍干時有許多不足之處:1.由于反應管呈上寬下窄的錐字形,還需要借助其他工具支撐,這樣反應管試劑與凍干機擱板的接觸面積很小,升華時傳熱會受到限制,延長了預凍和升華的時間,反應管中的凍干程序一般在24~30小時,凍干制品日產量很低。2.反應管中的凍干,在加入凍干混合試劑后,需要進行離心處理,排出氣泡,并將粘附在反應管壁上的試劑離心下來。3.反應管中的凍干,在凍干結束后需要關蓋,或者是開模具做帶豁口的反應管(排蓋)或者是凍干結束后自動壓蓋,凍干結束后將反應管取出,在凍干機外部關蓋,這種方法對環(huán)境有很高的要求,需要恒溫恒濕,濕度不能超過15%。適合凍干熒光PCR的試劑凍干機Pilot10-15T應用示例:
1.探針、底物、引物原料要求確定。
2.凍干溶液配方開發(fā),采用正交法或響應曲面法進行輔料篩選。
3.選擇適合的包材和模具。
4.設計凍干曲線配合輔料篩選。
5.確定配方及工藝。
6.穩(wěn)定性測試。
7.根據穩(wěn)定性測試結果修正工藝或配方。
8.整個環(huán)節(jié)注意環(huán)境、設備、人員的結合。
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